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用多参数流式细胞仪数据处理分析技术(PAT)方法评估菌蜕生产

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发表于 2016-5-5 11:44:26 |显示全部楼层
流式细胞术(FCM)是一种分析细胞悬浮液中单细胞性质的工具。

本文提出了一种改进的FCM方法来评估肠杆菌中的E裂解,E裂解的结果产生了细菌空壳——称为细菌菌蜕(BGs)——在医疗领域构成潜在的产品。与完整细胞相比BGs减少了光散射特性,结合可行的信息用荧光染料二(13-dibutylarbituric酸)trimethine氧杂菁(DiBAC4(3))从染色样本中获得细胞膜电势差,用该方法区分存活的细胞群,死亡的细胞和BGs。用第二个荧光染料RH414作为膜标记,排除非蜂窝质数据,这极大地提高了结果的质量。

使用体积绝对计数,从存活细胞群的菌落形成单位(CFU)的FCM与细胞计数的数据获得结果相符。该方法的适用性从几个肠杆菌群实验证明,验证了该方法作为弹性过程分析技术(PAT)E-溶解的评估工具和为生产大肠杆菌Nissle1917 BGs 20-lbatch过程中的颗粒计数。


[url=]Multi-parameter flow cytometry ...[/url]

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